大鼠坐骨神经电损伤后背根神经节中大电导钙激活钾通道表达变化及其对感觉传导功能的影响

摘要：目的 研究大鼠坐骨神经电损伤后脊髓背根神经节(DRG)中大电导钙激活钾(BKCa)通道表达变化及其对感觉传导功能的影响. 方法 取成年SD大鼠136只,按照随机数字表法分为正常对照组8只,假电伤组及75、100、125 V电伤组各32只.正常对照组大鼠不做处理,假电伤组大鼠仅行左侧坐骨神经主干钝性分离,75、100、125 V电伤组大鼠左侧坐骨神经主干造成相应电压电损伤.正常对照组大鼠于饲养1周时,假电伤组及各电伤组大鼠于伤后3d及1、2、3周,每组各取8只测定大鼠机械缩足反射阈值(PWMT),其中100 V电伤组大鼠伤后1周行前述检测后于鞘内注射NS1619,注射后3h内每隔30分钟测定1次PWMT.各组各时相点大鼠完成PWMT检测后处死,取脊髓L4～L6段DRG,采用免疫组织化学染色法观察BKCa通道分布,蛋白质印迹法、RT-PCR法分别检测BKCa通道蛋白、mRNA表达.对数据行单因素方差分析、析因设计方差分析、SNK检验. 结果 (1)与正常对照组的(11.2±2.0)g和假电伤组的(11.3±2.1)、(12.0±2.0)、(11.1±1.6)、(10.3±2.1)g比较,75、100 V电伤组大鼠伤后3d及1、2、3周PWMT显著降低[(5.8±0.6)、(5.0±0.8)、(4.2±0.3)、(5.9±1.1)g,(5.3±1.3)、(5.9±2.0)、(4.5±2.7)、(4.3±1.3)g,P值均小于0.05].125 V电伤组大鼠伤后3d、1周PWMT[(6.1±1.6)、(5.7±1.7)g]较正常对照组和假电伤组显著降低,伤后2、3周PWMT[(26.7±3.3)、(21.7±3.4)g]明显高于其余4组,P值均小于0.05.100 V电伤组大鼠伤后1周注射后3h内PWMT呈先增高后降低趋势,其中注射后30、60、90、120 min时PWMT为(8.5±0.8)、(9.7±1.2)、(11.0±1.5)、(8.6±0.8)g,较干预前明显增高(P值均小于0.05).(2)正常对照组及各时相点假电伤组大鼠DRG神经元细胞质、细胞膜BKCa通道阳性表达均较多;各电伤组大鼠DRG神经元细胞质、细胞膜BKCa通道阳性表达随伤后时间延长而减少,以125 V电伤组为明显.(3)伤后3d,各组大鼠DRG中BKCa通道蛋白水平相近(P值均大于0.05).与正常对照组的0.477±0.027、0.521±0.034、0.475±0.022和假电伤组的0.511±0.025、0.489±0.025、0.483±0.032比较,75、100、125 V电伤组大鼠伤后1、2、3周DRG中BKCa通道蛋白水平明显下调(0.274±0.026、0.202 ±0.019、0.285±0.033,0.253±0.022、0.233±0.024、0.203±0.017,0.092±0.017、0.095±0.021、0.087±0.016,P值均小于0.05).125 V电伤组大鼠伤后1、2、3周DRG中BKCa通道蛋白水平较75、100 V电伤组明显降低(P值均小于0.05).(4)与正常对照组的0.581±0.051和假电伤组的0.603±0.045、0.586±0.032、0.614±0.045、0.572±0.038比较,75、100、125 V电伤组大鼠伤后3d及1、2、3周BKCa通道mRNA水平显著下调(0.326±0.021、0.238±0.019、0.291±0.022、0.364±0.018,0.264±0.020、0.293±0.017、0.243±0.023、0.295±0.021,0.134±0.023、0.089±0.017、0.074±0.018、0.087±0.020,P值均小于0.05).125 V电伤组大鼠各时相点BKCa通道mRNA水平较75、100 V电伤组明显降低(P值均小于0.05). 结论 大鼠坐骨神经电损伤后,对应脊髓节段DRG中BKCa通道表达降低,其参与神经电损伤后触痛觉过敏的病理过程.