期刊简介
中华医学会主办。本刊是国内烧伤学术界惟一的全国性权威刊物，由国内外烧伤外科及相关学科著名专家组成编委会。烧伤的重要问题，通常也是内外科的基本问题。杂志力求充分展示本学科领域的新理论、新技术、新方法、新经验，注重实用性，讲究可读性。全方位展示本专业的研究进展、临床治疗和护理经验，将整形与康复理念贯穿于烧伤救治全过程，将独到的修复技术应用于各种类型的难治性创面。杂志目前已被《Medline》等10多个国际主要数据库收录，具有较大影响。
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首页>中华烧伤杂志
- 杂志名称：中华烧伤杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1009-2587
- 国内刊号：50-1120/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华医学会优秀期刊三等奖期刊收录：文摘与引文数据库, 万方收录(中), 医学文摘, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 哥白尼索引(波兰)
双链小片段干扰RNA抑制缺氧条件下乳鼠心肌细胞缺氧诱导因子1α表达
党永明；黄跃生；杨宗城；张东霞；李晓东；张铭；陈丽峰
关键词：细胞低氧, 缺氧诱导因子1α, RNA干扰
摘要：目的构建含缺氧诱导因子1α(HIF-1α)小片段干扰RNA(siRNA)靶序列的U6启动子表达框结构,观察其对缺氧条件下乳鼠心肌细胞HIF-1α表达的影响. 方法分离培养乳鼠心肌细胞,分为常规培养液对照组、RNA干扰(RNAi)组(转染无效干扰序列Ⅳ)、RNAi抑制组(转染有效干扰序列并按下游引物不同分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组).设计、合成3对(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)含HIF-1α编码基因片段(正、反义)和1对(Ⅳ)随机序列(正、反义)的PCR下游引物.PCR法构建U6启动子表达框及相应正、反序列表达框,同时转染心肌细胞.每组每时相点5皿细胞.于缺氧1 h后,用蛋白免疫印迹法(Western-blot)测定其蛋白水平表达,免疫组织化学法检验干扰效果.缺氧6 h后采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HIF-1α m RNA的表达. 结果筛选出的佳抑制片段为Ⅱ组序列.缺氧1 h,对照组、RNAi组心肌细胞HIF-1α蛋白水平显著增高,Ⅰ、Ⅱ、ⅢRNAi抑制组HIF-1α蛋白水平较对照组明显降低,其中Ⅱ组降低为显著(P<0.01);缺氧6 h,RNAi组心肌细胞HIF-1α mRNA水平较常氧条件下明显增高(P<0.01);RNAi抑制Ⅱ组未见明显增高(P>0.05). 结论构建的HIF-1αⅡ组表达框能有效地抑制缺氧乳鼠心肌细胞HIF-1α表达.
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